蛋白質(zhì)分離純化的五大步驟

　　蛋白質(zhì)分離純化的五大步驟。蛋白質(zhì)分離純化是用生物工程下游技術(shù)從混合物之當中分離純化出所需要得目的蛋白質(zhì)的方法。是當代生物產(chǎn)業(yè)當中的核心技術(shù)。該技術(shù)難度、成本均高；例如一個生物藥品的成本75%都花在下游蛋白質(zhì)分離純化當中。

　　1、鹽析法

　　鹽析法的根據(jù)是蛋白質(zhì)在稀鹽溶液中，溶解度會隨鹽濃度的增高而上升，但當鹽濃度增高到一定數(shù)值的時候，使水活度降低，進而導(dǎo)致蛋白質(zhì)分子表面電荷逐漸被中和，水化膜逐漸被破壞，最終引起蛋白質(zhì)分子間互相凝聚并從溶液中析出。

　　2、有機溶劑沉淀法

　　有機溶劑能降低蛋白質(zhì)溶解度的原因有二：其一、與鹽溶液一樣具有脫水作用；其二、有機溶劑的介電常數(shù)比水小，導(dǎo)致溶劑的極性減小。

　　3、蛋白質(zhì)沉淀劑

　　蛋白質(zhì)沉淀劑僅對一類或一種蛋白質(zhì)沉淀起作用，常見的有堿性蛋白質(zhì)、凝集素和重金屬等。

　　4、聚乙二醇沉淀作用

　　聚乙二醇和右旋糖酐硫酸鈉等水溶性非離子型聚合物可使蛋白質(zhì)發(fā)生沉淀作用。

　　5、選擇性沉淀法

　　根據(jù)各種蛋白質(zhì)在不同物理化學因子作用下穩(wěn)定性不同的特點，用適當?shù)倪x擇性沉淀法，即可使雜蛋白變性沉淀，而欲分離的有效成分則存在于溶液中，從而達到純化有效成分的目的。

　　不同蛋白質(zhì)具有不同的等電點，它們在被離子交換劑結(jié)合以前，移動之距離是不同的，洗脫出來的先后次序是按等電點排列的。