測試制備柱分離性能的步驟如下:
①考慮到填料從分析級直接放大到制備級的因素,如果要凈化大量化合物,需要考慮分析柱的規(guī)格和填料粒徑(10μm或更大);作為下一步產(chǎn)品凈化量較大的項目,必須考慮選擇填料粒徑較大、內(nèi)徑較大的色譜柱,在與分析柱相同的填料下凈化產(chǎn)品。
②對分析柱(4.6mm內(nèi)徑或更?。┻x擇性的研究,應(yīng)在各種填料和色譜條件下進行選擇。使用一些商品的液相色譜條件選擇軟件來比較各種色譜模式,從而縮短分離條件選擇的時間。
③在得到良好的分離條件后,需要測試分析制備柱上樣品的承載能力,比較各種樣品量下產(chǎn)品的純度,選擇理想產(chǎn)物純度的上樣量。
④選擇制備柱的規(guī)格,根據(jù)分析柱上獲得的樣品數(shù)據(jù)放大分離,通常選擇與分析柱粒徑相同的填料和色譜柱長度,以達到預(yù)測制備分離的預(yù)測。放大制備柱的樣品量應(yīng)根據(jù)制備柱與分析柱交叉截面積的比值進行選擇。
⑤檢查色譜分離結(jié)果、色譜餾出物的區(qū)域和純度。
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