在高效液相色譜(HPLC)分析中,目標峰分離度不足是實驗室常見的“頭疼問題”。分離度差不僅影響數(shù)據(jù)準確性,還可能導致結(jié)果誤判!別擔心,本文總結(jié)了7大核心解決方案,從流動相優(yōu)化到儀器維護,手把手教你拯救重疊峰!
分離度(Resolution, Rs)是衡量色譜峰分離效果的核心指標,通常要求Rs≥1.5。當Rs不足時,可能是以下原因?qū)е拢?/p>
色譜柱性能下降(柱效低、填料污染)
流動相選擇不當(pH、有機相比例、添加劑不匹配)
方法參數(shù)不合理(流速、溫度、梯度程序)
樣品過載或基質(zhì)干擾
調(diào)整有機相比例:
增加乙腈/甲醇比例可縮短保留時間,反之延長。通過微調(diào)比例(如±5%),拉開目標峰與干擾峰的間距。
精準控制pH值(針對可電離化合物):
酸性物質(zhì):降低pH抑制電離,增強保留;
堿性物質(zhì):升高pH促進電離,改善分離。
巧用添加劑:
添加離子對試劑(如0.1%三氟乙酸)或緩沖鹽(如磷酸鹽),增強極性化合物分離。
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