分離純化是從動植物組織、微生物培養(yǎng)產(chǎn)物或細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)物中分離及純化目的產(chǎn)物的過程。系統(tǒng)地研究生物分離純化過程,能夠揭示其內(nèi)在的分離原理。利用這些原理,我們可以設(shè)計目的產(chǎn)物的分離純化方法。
由于生物活性物質(zhì)具有生理活性或藥理作用,因此在分離純化的過程中必須根據(jù)目標(biāo)產(chǎn)物的特點,在保證其生物機能的前提下進(jìn)行分離純化操作。生物分離純化的特點主要體現(xiàn)在以下幾個方面。
1、目的產(chǎn)物濃度低,純化難度大
原料液中目的產(chǎn)物的濃度一般都很低,有時甚至是極微量的,如yi腺中脫氧核糖核酸酶的含量為0.04%、胰島素含量為0.002%,膽紅素在膽汁中含量為0.05%~0.08%,但雜質(zhì)的含量卻相對較高,這樣就有必要對原料液進(jìn)行高度濃縮。
2、活性物質(zhì)性質(zhì)不穩(wěn)定,操作過程容易失活
生物活性物質(zhì)的生理活性大多是在生物體內(nèi)的溫和條件下維持并發(fā)揮作用的,目的產(chǎn)物大多數(shù)對熱、酸、堿、重金屬、pH值以及多種理化因素都比較敏感,容易失活。外部條件不穩(wěn)定或急劇發(fā)生變化,容易引起生物活性的降低或喪失。因此,為維持生物活性物質(zhì)的活性,分離純化過程的操作條件都有嚴(yán)格的限制。
3、生物材料中的生化組分?jǐn)?shù)量大,分離困難
原料液中雜質(zhì)成分多,甚至目的產(chǎn)物與雜質(zhì)的理化性質(zhì)如溶解度、相對分子質(zhì)量、等電點等往往比較相近,所以分離純化比較困難。
4、生物材料容易變質(zhì),保存困難
生物材料容易腐敗、染菌、被微生物的活動所分解或被自身的酶所破壞,甚至機械攪拌、金屬器械、空氣、日光等對生物活性物質(zhì)的活性都會產(chǎn)生影響。因此,生物分離純化方法的正確選擇,對維持目的產(chǎn)物的穩(wěn)定性起著至關(guān)重要的作用。
5、生物產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)高
生物產(chǎn)品一般用作醫(yī)藥、食品和化妝品,與人類生命息息相關(guān)。因此,要求分離純化過程必須除去原料液中的熱原及具有免疫原性的異體蛋白等有害人體健康的物質(zhì).并且防止這些物質(zhì)在操作過程中從外界混入。
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